Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Длина волны детектора: изменения не допускаются.
Неподвижная фаза:
- длина колонки: ±70%,
- внутренний диаметр колонки:
±25% (набивные колонки),
±50% (капиллярные колонки),
- размер частиц: максимальное уменьшение на 50%, увеличение не допускается (набивные колонки).
Скорость потока: ±50%.
Температура: ±10%.
Вводимый объём пробы: может быть уменьшен, при условии того, что используемое детектирование и повторяемость остаются удовлетворительными.
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Метод внешнего стандарта. Концентрация анализируемого компонента (компонентов) определяется путём сравнения сигнала (сигналов) (пика (пиков)),
полученного для исследуемого раствора, и сигнала (сигналов) (пика(пиков)), полученного для раствора сравнения.
Метод внутреннего стандарта. В исследуемый раствор и раствор сравнения вводятся одинаковые количества компонента (внутреннего стандарта), который разделяется с исследуемым веществом и не взаимодействует с ним. Концентрация исследуемого вещества определяется путём сравнения отношения площадей или высот пиков, соответствующих исследуемому веществу и внутреннему стандарту, для анализируемого раствора и отношения площадей или высот пиков, соответствующих исследуемому веществу и внутреннему стандарту, для раствора сравнения.
Методика нормализации. Процентное содержание одного или большего числа компонентов исследуемого вещества рассчитывается путём определения площади пика или пиков, как процентной части общей площади всех пиков, исключая пики, соответствующие растворителям или любым добавленным реагентам и тем веществам, содержание которых ниже допустимого предельного содержания.
Методика градуировки. Определяют связь между измеренным или рассчитанным сигналом (y) и количеством (концентрацией, массой и т.д.) определяемого вещества (x) и рассчитывают уравнение градуировочной функции. Аналитические результаты рассчитывают из измеренного или рассчитанного сигнала с помощью обратной функции.
Для количественных определений основного вещества и компонентов в частных статьях обычно используются методы внешнего и внутреннего стандартов или методика градуировки; методика нормализации обычно не применяется. При проведении испытаний на родственные соединения обычно применяют метод внешнего стандарта с одним раствором сравнения либо методику нормализации. Вместе с тем, при использовании как методики нормализации, так и метода внутреннего стандарта, в случае если для сравнения используются разбавления исследуемого раствора, сигналы для родственных веществ должны быть близки к сигналу самого вещества (фактор соответствия от 0,8 до 1,2), в противном случае в тесте должны быть указаны величины поправочных факторов, обратных факторам соответствия.
Фактор соответствия представляет собой относительную величину, равную соответствию равных масс родственных веществ при условиях, описанных в тесте.
Если испытание на родственные соединения предписывает определение общего содержания примесей либо подразумевает количественное определение примеси, важно выбрать подходящую величину порога и подходящие условия сложения площадей пиков. В таких испытаниях допустимый предел, т.е. площади пиков, которые лежат ниже предела и не принимаются во внимание, обычно равен 0,05%. Таким образом, пороговая величина в случае сложения величин соответствует, по крайней мере, половине допустимого предела. Сложение площадей пиков примесей, которые не полностью разделяются с основным пиком, лучше всего проводить экстраполяцией. Пики, соответствующие растворителям, используемым для растворения образца, также не принимаются во внимание.
2.2.47. КАПИЛЛЯРНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ
ОБЩИЕ ПРИНЦИПЫ
Капиллярный электрофорез - это физический метод анализа, основанный на миграции внутри капилляра заряженных аналитов, растворённых в растворе электролита, под влиянием постоянного электрического поля.
Скорость миграции аналита под влиянием электрического поля с напряжённостью E определяется электрофоретической подвижностью аналита и электроосмотической подвижностью буферного раствора внутри капилляра. Электрофоретическая подвижность вещества (pep) зависит от его свойств (электрический заряд, размер и форма молекул) и от свойств буферного раствора, в котором происходит процесс миграции (тип и ионная сила электролита, рН, вязкость и наличие добавок). Электрофоретическая скорость (vep) вещества, частицы которого принимаются за сферические, описывается уравнением:
_ T7-( q ^ СVs
vep m ep ' E
6phr
L
где:
q - эффективный заряд вещества,
П - вязкость раствора электролита, r -Стоксовский радиус частиц вещества,
V - приложенное напряжение,
L - общая длина капилляра.
При помещении капилляра, заполненного буферным раствором, в электрическое поле внутри капилляра начинается перемещение растворителя, называемое электроосмотическим потоком. Скорость электроосмотического потока зависит от электроосмотической подвижности (peo), которая, в свою очередь, зависит от плотности заряда на внутренней стенке капилляра и свойств буферного раствора. Электроосмотическая скорость (veo) определяется уравнением:
